Evidencia algunas etapas de la mitosis en las células vegetales
Introducción
En esta práctica aprenderás a identificar visualmente las etapas de la mitosis en células vegetales. La mitosis es un proceso fundamental para el crecimiento, desarrollo y reparación de los organismos. Usaremos raíces de cebolla y un colorante que tiñe la cromatina del núcleo, lo que nos permitirá observar con claridad cómo se divide una célula.
Recomendaciones
- Sé cuidadoso al manipular materiales cortopunzantes y productos químicos.
- No comas ni bebas en el laboratorio.
- Usa guantes y lava tus manos al finalizar.
- Trabaja con orden y en silencio para facilitar la observación.
- Si no logras ver las fases claramente, solicita ayuda antes de repetir el montaje.
Materiales
| Categoría | Elemento |
|---|---|
| Muestra biológica | Puntas de raíz de cebolla (germinada 3 a 5 días antes) |
| Reactivos | Orceína acética (preferida), violeta de genciana o violeta de Gram (alternativas) |
| Fijador | Ácido acético o etanol (alcohol) |
| Cristalería | Portaobjetos, cubreobjetos, pipetas, vaso de precipitados |
| Herramientas | Cuchilla de afeitar, goteros, pinzas |
| Calor | Mechero o plancha eléctrica (opcional para fijación) |
| Observación | Microscopio óptico escolar |
| Higiene | Guantes, papel absorbente, frascos de descarte |
Cuidado: Objeto cortopunzante
Manejen con mucho cuidado, y de forma correcta, el bisturí y los reactivos químicos.Procedimiento experimental
- Preparación de la cebolla:
- Escojan un bulbo de cebolla que no tenga raíces visibles. Si las tiene, retírenlas cuidadosamente con tijeras o bisturí.
- Inserten palillos o soportes para suspender la cebolla en un beaker con agua, de modo que solo la base toque el agua, sin sumergirse completamente ni tocar el fondo.
- Dejen la cebolla germinando durante 4 a 5 días, observando el crecimiento de las raíces.
- Recolección de raíces:
- Una vez hayan crecido las raíces, corten los últimos 5 mm con bisturí o tijeras. Estas zonas contienen células en división activa.
- Montaje de muestra:
- Realicen cortes finos y transversales de las raíces con mucho cuidado.
- Coloquen los cortes en un vidrio de reloj.
- Tinción – Comparación entre colorantes:
- Agreguen a los cortes el violeta de genciana (3–4 gotas con pipeta).
- Dejen actuar el colorante por 10 minutos.
- Fijación térmica (opcional si se cuenta con mechero):
- Si tienen un mechero o plancha eléctrica, calienten suavemente el vidrio de reloj con las raíces teñidas, usando pinzas de madera. No dejen que el líquido hierva.
- Montaje sobre portaobjetos:
- Con una pinza, transfieran cuidadosamente cada raíz teñida a un portaobjetos.
- Colóquenle encima un cubreobjetos y presionen suavemente con el borrador de un lápiz para extender el tejido.
- Eliminación del exceso de colorante:
- Usen papel absorbente para eliminar el exceso de líquido alrededor del cubreobjetos.
- Observación al microscopio:
- Coloque cada muestra en el microscopio.
- Con el objetivo 10X, enfoquen y busquen células en división.
- Luego cambien a 40X para observar con más detalle.
- Si cuentan con 100X y aceite de inmersión, realicen observación avanzada (opcional).
- Registro y conteo:
- Busquen e identifiquen células en interfase, profase, metafase, anafase y telofase.
- Cuenten cuántas células encuentran en cada fase.
- Observen la calidad de observación y el contraste del núcleo.
- Registro final:
- Dibujen o fotografíen lo observado.
Sistematización de la práctica
Cada grupo debe registrar y analizar lo siguiente:
- Datos generales de la práctica:
- Fecha
- Integrantes del grupo
- Nombre del colorante usado
- Tiempo de exposición al colorante
- Observación microscópica por colorante:
- Sse deben observar las células teñidas bajo el microscopio y llenar la siguiente tabla:
| Fase mitótica | Cantidad de células observadas |
|---|---|
| Interfase | |
| Profase | |
| Metafase | |
| Anafase | |
| Telofase |
Tabla: Cantidad de celular por fase celular.
Registren el conteo en una tabla como la siguiente :
| Fase | No de celulas | Objetivo |
|---|---|---|
| Interfase | ||
| Profase | ||
| Metafase | ||
| Anafase | ||
| Telofase | ||
Tabla: Número de células observadas en cada fase del ciclo celular.
Luego, realicen una gráfica de barras. Tengan en cuenta que van a representar la cantidad de células que vieron en cada etapa del ciclo celular y en cada uno de los objetivos del microscopio.
Gráfica 1. Número de células observadas en cada fase del ciclo celular.
- Análisis comparativo:
- ¿Cuál de los dos colorantes permitió observar mejor las fases mitóticas?
- ¿Hubo diferencias en el número de células identificadas en cada fase?
- ¿Qué limitaciones encontraron con alguno de los colorantes?
- Reflexión final individual:
- ¿Qué aprendiste hoy sobre la mitosis?
- ¿Qué fue lo más difícil de la práctica?
- ¿Qué harías diferente en un próximo intento?
